Jaké jsou hlavní diagnostické příznaky řešetlákové kůry?

Sbírá se na jaře před rozkvětem, kůra kmenů a větví divokého keře nebo malého krušinového stromu olše (syn.: řešetlák křehký) – Frangula alnus Mill. (syn.: Rhamnus frangula L.), fam. řešetlákový – rhamnaceae.

MINISTERSTVO ZDRAVÍ RUSKÉ FEDERACE

FARMAKOPOEÁLNÍ ČLÁNEK

Řešetlák olšové kůry FS.2.5.0021.15

Frangulae ALNi сortex Namísto GF XI, sv. 2, čl. 2

(dodatek č. 2 ze dne 20.08.1997)

Sbírá se na jaře před rozkvětem, kůra kmenů a větví divokého keře nebo malého krušinového stromu olše (syn.: řešetlák křehký) – Frangula alnus Mill. (syn.: Rhamnus frangula L.), fam. řešetlákový – rhamnaceae.

Obsah

1. PRAVOST
2. Vnější znaky
3. Mikroskopické znaky
4. Stanovení hlavních skupin biologicky aktivních látek
5. Chromatografie na tenké vrstvě
6. ZKOUŠKY
7. Влажность
8. Popel celkem
9. Popel, nerozpustný v kyselině chlorovodíkové
10. Broušení surovin
11. Zahraniční záležitost
12. Plochy kůry pokryté frutikózními lišejníky
13. Plochy kůry se zbytky dřeva
14. Kusy kůry silnější než 2 mm
15. Organická nečistota
16. Minerální nečistota
17. Těžké kovy
18. Radionuklidy
19. Zbytky pesticidů
20. Mikrobiologická čistota
21. kvantifikace
22. Množství antraglykosidů, pokud jde o glukofrangulin A
23. Abstrakt vědeckého článku o základní medicíně, autor vědecké práce – Kurkin Vladimir Aleksandrovich, Shmygareva Anna Anatolyevna, Daeva Elena Dmitrievna, Kadentsev Valentin Ivanovich
24. Podobná témata vědecké práce o základní medicíně, autorem vědecké práce je Vladimir Aleksandrovich Kurkin, Anna Anatolyevna Shmygareva, Elena Dmitrievna Daeva, Valentin Ivanovič Kadentsev
25. Text vědecké práce na téma “Antraglykosidy kůry krušiny (Frangula alnus. Mill.)”

PRAVOST

Vnější znaky

Celá surovina. Trubkovité nebo rýhované kusy kůry různých délek o tloušťce 0,5 – 2 mm. Vnější povrch kůry je víceméně hladký, tmavě hnědý, šedohnědý, tmavě šedý nebo šedý, často s bělavou příčně protáhlou čočkou nebo šedými skvrnami, lehkým seškrábnutím vnější části korku se objeví červená vrstva. Vnitřní povrch je hladký, žlutooranžové nebo červenohnědé barvy. Při pohledu pod lupou (10×) nebo stereomikroskopem (16×) je zlomenina světle žlutá, rovnoměrně jemně štětinatá. Vůně je slabá. Chuť vodního extraktu je hořká.

drcená surovina. Kousky kůry různých tvarů procházející sítem 7 mm. Barva kůry na vnější straně je tmavě hnědá, šedohnědá, tmavě šedá nebo šedá, na vnitřní straně je žlutooranžová nebo červenohnědá. Vůně je slabá. Chuť vodního extraktu je hořká.

Порошок. Při zkoumání prášku pod lupou (10×) nebo stereomikroskopem (16×) se směs žlutohnědých částeček kůry s hnědými, tmavě hnědými, šedohnědými, tmavě šedými, šedými inkluzemi procházející sítem o 2 jsou vidět otvory mm. Vůně je slabá. Chuť vodního extraktu je hořká.

Mikroskopické znaky

Celá surovina. Při zkoumání příčného řezu by měla být vidět tmavě červená, široká korkovitá vrstva 10–20 řad buněk, na mnoha místech přerušená čočkou. Dále leží lamelární kollenchym. Vnější kůra se skládá z oválných buněk a obsahuje velké množství drúz šťavelanu vápenatého; Některé buňky obsahují škrobová zrna. Mechanická vlákna s mírně zesílenými a mírně lignifikovanými skořápkami. Dřeňové paprsky jsou často zakřivené, jedno-, dvou-, méně často třířadé se žlutým obsahem. Mezi dřeňovými paprsky jsou skupiny nažloutlých lignifikovaných lýkových vláken se silnými stěnami, obklopené krystalickou výstelkou a tvořících soustředné pásy.

drcená surovina. Při zkoumání lisovaného preparátu by měly být patrné fragmenty tmavě červené korkové tkáně, skupiny nažloutlých lignifikovaných lýkových vláken s krystalickou výstelkou, drúzy a monokrystaly šťavelanu vápenatého.

Prášek. Při zkoumání mikrosklíčka by měly být viditelné fragmenty tmavě červené korkové tkáně; skupiny nažloutlých lignifikovaných lýkových vláken se silnými stěnami, obklopené krystalonosnou výstelkou; drúzy a monokrystaly šťavelanu vápenatého.

Kůra řešetlákové olše

Obrázek – Kůra olše řešetlákové.

1 – průřez kůrou (40×), 2 – fragment průřezu kůry:
a – zátka, b – kollenchym, c – primární kůra (200×), 3 – fragment zátka (200×), 4 – fragment parenchymu s drúzami šťavelanu vápenatého (200×),
5 – fragment lýkových vláken s krystalickou výstelkou:
a – průřez, b – drcený vzorek (200×)

Stanovení hlavních skupin biologicky aktivních látek

Chromatografie na tenké vrstvě

Detekční roztok. Asi 0,5 g hydroxidu draselného se rozpustí v 10 ml 50% alkoholu. Skladovatelnost roztoku není delší než 3 měsíce při skladování na chladném a tmavém místě.

Standardní roztok vzorku (RM) barbaloinu. Asi 0,005 g CO barbaloinu (aloinu) se rozpustí v 10 ml 96% alkoholu a míchá. Trvanlivost roztoku není delší než 3 měsíce při skladování v dobře uzavřeném obalu, na chladném místě chráněném před světlem.

Asi 0,5 g suroviny rozdrcené na velikost částic procházejících sítem s otvory o velikosti 0,5 mm se vloží do baňky se zabroušeným sklem o objemu 100 ml, přidá se 5 ml lihu 96 % a zahřívá se pod reflux ve vodní lázni až do varu. Po ochlazení se výsledný extrakt filtruje přes papírový filtr (zkušební roztok).

Na startovací čáru chromatografické desky se nanese 10 μl zkušebního roztoku a vedle 10 μl roztoku barbaloinu CO s vrstvou silikagelu na hliníkovém substrátu o rozměrech 5×10 cm.

Deska s nanesenými vzorky se suší při pokojové teplotě po dobu 5 minut, umístí se do komory (uvnitř vyložené filtračním papírem), předem nasycené po dobu alespoň 60 minut směsí rozpouštědel ethylacetát – 96% alkohol – voda (100: 17:13) a chromatografuje se vzestupným způsobem. Když čelo rozpouštědla překročí 80–90 % délky desky od startovní čáry, deska se vyjme z komory, suší se, dokud nejsou odstraněny stopy rozpouštědel, zpracuje se detekčním roztokem a suší se v sušárně při 100– 105 °C po dobu 3–5 minut a pozorováno v UV světle při vlnové délce 365 nm.

Chromatogram roztoku barbaloinu CO by měl vykazovat adsorpční zónu s hnědožlutou, zelenožlutou nebo žlutou fluorescencí.

Chromatogram zkušebního roztoku musí vykazovat 2 adsorpční zóny s oranžově červenou nebo oranžovou fluorescencí, detekce ostatních adsorpčních zón je povolena; Není povoleno detekovat zónu od žluté po červenooranžovou barvu na úrovni zóny barbaloinového CO

1. Po navlhčení vnitřního povrchu kůry nebo kůrového prášku 1 – 2 kapkami 10% roztoku hydroxidu sodného by mělo být pozorováno krvavě červené zbarvení (deriváty antracenu).

ZKOUŠKY

Влажность

Celé suroviny, drcené suroviny, prášek – ne více než 15 %.

Popel celkem

Celé suroviny, drcené suroviny, prášek – ne více než 5 %.

Popel, nerozpustný v kyselině chlorovodíkové

Celé suroviny, drcené suroviny, prášek – ne více než 0,6 %.

Broušení surovin

Celá surovina: částice procházející sítem s otvory o velikosti 3 mm – ne více než 5%. Drcené suroviny – částice, které neprojdou sítem s otvory o velikosti 7 mm – ne více než 5%; částice procházející sítem s otvory o velikosti 0,5 mm – ne více než 5%. Prášek – částice, které neprojdou sítem s otvory o velikosti 2 mm – ne více než 5%; částice procházející sítem s otvory o velikosti 0,18 mm – ne více než 5%.

Zahraniční záležitost

Plochy kůry pokryté frutikózními lišejníky

Celé suroviny – ne více než 1 %.

Plochy kůry se zbytky dřeva

Celé suroviny – ne více než 1 %.

Kusy kůry silnější než 2 mm

Celé suroviny – ne více než 3 %.

Organická nečistota

Celé suroviny drcené suroviny – ne více než 0,5 %.

Minerální nečistota

Celé suroviny, drcené suroviny, prášek – ne více než 0,5 %.

Těžké kovy

Radionuklidy

V souladu s požadavky monografie Všeobecného lékopisu „Stanovení obsahu radionuklidů v léčivých rostlinných materiálech a léčivých rostlinných přípravcích“.

Zbytky pesticidů

Mikrobiologická čistota

kvantifikace

Celé suroviny drcené suroviny, prášek: množství antraglykosidů, pokud jde o istizin nebo glukofrangulin A, není menší než 4,5 %.

Сumma antraglykosidy pokud jde o glukofrangulin A

Roztok uhličitanu sodného 5%. 5,0 g bezvodého uhličitanu sodného se rozpustí ve vodě, objem roztoku se doplní vodou na 100 ml a promíchá se. Při skladování na chladném místě, chráněném před světlem, není skladovatelnost roztoku delší než 30 dnů.

Žláza(III) roztok chloridu (hustota 1,07 – 1,08). 20,0 g chloridu železitého se rozpustí ve 100 ml vody, upraví se vodou na hustotu 1,07 – 1,08 a promíchá. Trvanlivost roztoku není delší než 3 měsíce při skladování v dobře uzavřeném obalu, na chladném místě chráněném před světlem.

Alkoholový roztok octanu hořečnatého 0,5 %. 0,5 g octanu hořečnatého se rozpustí v 96% alkoholu, objem roztoku se stejným alkoholem upraví na 100 ml a míchá se. Skladovatelnost roztoku není delší než 2 měsíce při skladování na chladném a tmavém místě.

Pro analýzu se používá diethylether s kvalifikací „chemicky čistý“.

Analytický vzorek surovin je rozdrcen na velikost částic procházející sítem s otvory o velikosti 0,5 mm. Asi 0,25 g (přesně odvážené) suroviny se vloží do baňky se zabroušenou částí o objemu 100 ml, přidá se 25 ml 80% lihu, zváží se s chybou ± 0,01 g, napojí se na zpětný chladič. a zahřívá se ve vroucí vodní lázni po dobu 15 minut. Po ochlazení na teplotu místnosti se baňka znovu zváží a doplní se na původní hmotnost 80% alkoholem. Obsah baňky se filtruje přes skládaný papírový filtr.

5,0 ml filtrátu se umístí do dělicí nálevky o objemu 250 ml, přidá se 50 ml vody a 0,10 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a opatrně se protřepává 2 – 3 minuty s 20 ml petroletheru (čistota pro činidla). Po úplném oddělení fází se spodní vodná vrstva přenese do 100 ml kádinky, horní etherová vrstva se přenese do 250 ml baňky. Poté se vodná vrstva z kádinky přenese do stejné dělicí nálevky a podobně se ještě čtyřikrát zpracuje petroletherem (podíly 4 ml). Vodná vrstva se přenese do 20 ml odměrné baňky. Spojené ropné extrakty se převedou zpět do dělicí nálevky a dvakrát se promyjí vodou (podíly 100 ml), vodná vrstva se umístí do stejné odměrné baňky o objemu 2 ml, přičemž v etherové vrstvě zůstanou tmavé vločky. Do odměrné baňky se spojenými vodnými extrakty se přidá 15 ml 100% roztoku uhličitanu sodného a objem roztoku se upraví vodou po značku (roztok A).

Do baňky se zábrusem o objemu 50,0 ml se odpipetuje 250 ml roztoku A, přidá se 20 ml roztoku chloridu železitého (hustota 1,07 – 1,08), napojí se na zpětný chladič a zahřeje se ve vroucí vodě. lázni za občasného míchání po dobu 20 minut, ponořením baňky do vody v lázni nad hladinu roztoku v baňce. Poté se do baňky přidají 2 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a za častého protřepávání se pokračuje v zahřívání po dobu 20 minut, dokud se sraženina nerozpustí.

Baňka se ochladí a její obsah se přenese do dělicí nálevky o objemu 500 ml, baňka se propláchne 30 ml etheru, přidá se k hlavnímu roztoku v dělicí nálevce a mírně se třepe 2 – 3 minuty. Po úplném oddělení fází se spodní vodná vrstva přenese do stejné 250ml baňky a etherová vrstva se sebere do 100ml baňky. Extrakce se opakuje ještě 2x stejným způsobem. Spojené etherické extrakty se převedou zpět do dělicí nálevky a promyjí se dvakrát vodou (vždy 2 ml), vodná vrstva se odloží. Etherové extrakty se filtrují přes nálevku s filtračním papírem obsahujícím 15 g bezvodého síranu sodného do 3,0 ml odměrné baňky. Nálevka s bezvodým síranem sodným se promyje etherem a objem roztoku se upraví po značku stejným rozpouštědlem a promíchá se (roztok B).

Po 60 minutách se 20,0 ml roztoku B odpipetuje do nízké skleněné kádinky nebo lahvičky o objemu 100 ml a suší se do sucha v digestoři. Suchý zbytek se úplně rozpustí
10 ml 0,5% alkoholového roztoku octanu hořečnatého (roztok B).

Optická hustota roztoku B se měří na spektrofotometru při vlnové délce 515 nm v kyvetě s tloušťkou vrstvy 10 mm za použití 96% alkoholu jako referenčního roztoku.

Obsah množství antraglykosidů v přepočtu na glukofrangulin A v absolutně suchých surovinách v procentech (Х) se vypočítá pomocí vzorce:

kde А – optická hustota roztoku B;

– specifický absorpční index glukofrangulinu A při vlnové délce 515 nm, rovný 204;

а – hmotnost surovin, g;

W – vlhkost surovin, %.

Сumma antraglykosidy pokud jde o istizin

Alkalický roztok amoniaku. 50 g hydroxidu sodného se rozpustí za míchání v 870 ml vody. Po ochlazení roztoku se přidá 80 ml 25% koncentrovaného roztoku amoniaku a promíchá se. Doba použitelnosti roztoku je 1 den.

Analytický vzorek surovin je rozdrcen na velikost částic, které projdou sítem s otvory o velikosti 1 mm. Asi 0,05 g (přesně odvážené) nadrcené suroviny se vloží do baňky se zabroušenou částí o objemu 100 ml, přidá se 7,5 ml ledové kyseliny octové a směs se zahřívá ve vroucí vodní lázni pod zpětným chladičem 15 minut. Po ochlazení se do baňky přes ledničku přidá 30 ml etheru a vaří se 15 minut ve vodní lázni. Potom se extrakt ochladí, přefiltruje přes vatu do 300 ml dělicí nálevky a vata se promyje 20 ml etheru. Vata se převede zpět do baňky, přidá se 30 ml etheru a vaří se 10 minut. Ochlazený éterický extrakt se filtruje přes vatu do stejné dělicí nálevky. Baňka se dvakrát propláchne etherem (vždy 10 ml) a přefiltruje přes stejnou vatu. Ke spojeným extraktům podél stěn opatrně přidejte 100 ml alkalického roztoku amoniaku a jemně protřepávejte po dobu 5–7 minut, přičemž nálevku ochlaďte pod tekoucí studenou vodou. Po úplném oddělení se průhledná červená spodní vrstva bez filtrace nalije do odměrné baňky o objemu 250 ml a na etherovou vrstvu se působí 20ml dávkami alkalického roztoku amoniaku, dokud se kapalina nepřestane barvit, barevné roztoky se nalijí do stejné odměrné baňce a objem roztoku v baňce se upraví alkalickým roztokem amoniaku po značku.

25,0 ml výsledného roztoku se umístí do baňky a zahřívá se 15 minut ve vroucí vodní lázni pod zpětným chladičem. Po ochlazení se změří optická hustota roztoku na fotoelektrokolorimetru při vlnové délce asi 540 nm v kyvetě s tloušťkou vrstvy 10 mm za použití alkalického roztoku amoniaku jako referenčního roztoku. Pokud je barva příliš intenzivní, roztok se před kolorimetrií zředí alkalickým roztokem amoniaku.

Koncentrace antraglykosidů ve smyslu istizinu v roztoku se stanoví pomocí kalibračního grafu.

Obsah antraglykosidů v přepočtu na istizin v absolutně suchých surovinách v procentech (X) se vypočítá pomocí vzorce:

kde С – koncentrace antraglykosidů ve smyslu istizinu v 1 ml roztoku zjištěná z kalibračního grafu, g;

a – hmotnost surovin, g;

W – vlhkost surovin, %.

Konstrukce kalibračního grafu. 50,0 g chloridu kobaltnatého
(CoCl₂ 6H₂O), vysušený do konstantní hmotnosti, vloží se do odměrné baňky o objemu 500 ml, rozpustí se ve 250 ml vody, přidá se 1 ml kyseliny chlorovodíkové, objem roztoku se upraví vodou po značku a promíchá. Z tohoto roztoku se připraví řada zředěných roztoků (č. 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12) obsahujících 0,0025 chloridu kobaltnatého; 0,0050; 0,0075; 0,0100; 0,0125; 0,0150; 0,0175; 0,0200; 0,0225; 0,0250; 0,0275; 0,0300 g v 1 ml a jejich optická hustota se měří na fotoelektrokolorimetru při vlnové délce asi 530 nm v kyvetě o tloušťce vrstvy 10 mm za použití vody jako referenčního roztoku. Pro sestavení kalibračního grafu se koncentrace roztoků vynese na ose x a jejich optická hustota se vynese na osu pořadnice. V tomto případě jsou koncentrace roztoků chloridu kobaltnatého vyjádřeny v odpovídajících koncentracích derivátů anthracenu (ve smyslu istizinu) pomocí tabulky.

Tabulka – Poměry obsahu derivátů anthracenu ve vztahu k isistizinu obsahujícímu chlorid kobaltnatý (CoCl₂ 6H₂O), g/ml v roztoku

Abstrakt vědeckého článku o základní medicíně, autor vědecké práce – Kurkin Vladimir Aleksandrovich, Shmygareva Anna Anatolyevna, Daeva Elena Dmitrievna, Kadentsev Valentin Ivanovich

Z kůry řešetláku (Frangula alnus Mill.) byly izolovány Frangulin A (6-O-α-L-rhamnopyranosid frangul-emodinu) a frangulin B (6-O-β-D-apiofuranosid frangul-emodinu). Na základě výsledků studie jsou zdůvodněny metodické přístupy ke standardizaci surovin, které spočívají v použití standardního vzorku frangulina A (dominantního antraglykosidu) v analytických metodách. Byly vyvinuty metody pro stanovení pravosti surovin řešetláku pomocí chromatografie na tenké vrstvě a UV spektroskopie.

Podobná témata vědecké práce o základní medicíně, autorem vědecké práce je Vladimir Aleksandrovich Kurkin, Anna Anatolyevna Shmygareva, Elena Dmitrievna Daeva, Valentin Ivanovič Kadentsev

Extrakční přípravky z kůry krušiny a metodické přístupy ke stanovení derivátů anthracenu v nich

Text vědecké práce na téma “Antraglykosidy kůry krušiny (Frangula alnus. Mill.)”

Chemie rostlinných materiálů. 2012. č. 1. s. 83-86.

MDT 615.32: 547.972+543.544 ANTRAGLYKOSIDY FRANGULA ALNUS MILL.

© V.A. Kurkin1, A.A. Shmygareva1, E.D. Daevti2, V.I. Kadentsev2

1 Samara State Medical University, st. Chapaevskaya, 89, Samara, 443099 (Rusko), e-mail: vakur@samaramail.ru

2 Ústav organické chemie pojmenovaný po. N.D. Zelinsky RAS, Leninsky Ave., 47, Moskva, 119991 (Rusko), e-mail: Lena_Daeva@mail.ru; vkadents@ioc.ac.ru

Z kůry krušiny (Frangula alnus Mill.) byly izolovány Frangulin A (6-O-a-L-rhamnopyranosid frangul-emodinu) a frangulin B (6-O-R-B-apiofuranosid frangul-emodinu). Na základě výsledků studie jsou zdůvodněny metodické přístupy ke standardizaci surovin, které spočívají v použití standardního vzorku fran-gulin A (dominantní antraglykosid) v analytických metodách. Byly vyvinuty metody pro stanovení pravosti surovin řešetláku pomocí chromatografie na tenké vrstvě a UV spektroskopie.

Klíčová slova: Frangula alnus Mill., řešetlák, kůra, deriváty anthracenu, fangulin A, fangulin B, TLC analýza, UV spektroskopie.

Práce byla provedena za podpory projektu 02.740.11.0650 Federální cílený program „Vědecké a vědecko-pedagogické

personál inovativního Ruska“ pro roky 2009-2013.

Kůra krušiny (Frangula alnus Mill.) slouží jako zdroj řady léčivých laxativ [1-4]. V souladu se Státním lékopisem SSSR, vydání XI, část „Kvalitativní reakce“ v lékopisném článku „Křehká kůra řešetláku“ (článek 2) zahrnuje pouze reakce ze zkumavek [5]. Reakce použitá v této regulační dokumentaci s 10% roztokem hydroxidu sodného (při navlhčení vnitřního povrchu kůry 1-2 kapkami je pozorováno krvavě červené zbarvení), stejně jako Borntregerova reakce, neztratily své relevance, v případě léčiv (odvar, tekutý extrakt, extrakt suchý, sirup atd.) nám však neumožňují plně vyřešit problém určení pravosti. Jednou z nadějných metod pro stanovení pravosti rostlinných surovin je tenkovrstvá chromatografie (TLC) [2, 6], použití TLC je však možné pouze na základě hloubkového studia komponentního složení léčivé rostliny. Zavedení moderních metod analýzy kůry krušiny a přípravků na ní založených podle našeho názoru brání nejednotnost údajů o složkovém složení antraglykosidů této suroviny. Tuzemská literatura tedy uvádí přítomnost oxidovaných forem frangularosidu – glukofrangulinu a frangulinu (deriváty frangul-emodinu) v kůře řešetláku křehkého [4, 7], zahraniční vědci se zaměřují na glukofrangulin A a B a také na fangulin A a B [6, 8, 9]. V souladu s tím Evropský lékopis stanoví přepočet obsahu sumy derivátů anthracenu, respektive sumy glukofrangulinů, na glukofrangulin A [10].

Účelem této práce je studium komponentního složení antraglykosidů v kůře krušiny.

Předmětem této studie byly vzorky křehké kůry řešetláku nasbírané v Botanické zahradě Samarské státní univerzity v dubnu až květnu 2009, stejně jako průmyslové

* Autor, se kterým si dopisovat.

vzorek surovin (PKF Fitofarm, Krasnodarské území). Křehká kůra krušiny (200 g) byla podrobena vyčerpávající extrakci 70% etylalkoholem, kombinujícím metodu macerace (24 hodin) s následnou tepelnou extrakcí při teplotě 85-90 °C. Vodně-alkoholické extrakty se odpaří ve vakuu na hustý zbytek (asi 50 ml). Kondenzovaný extrakt byl vysušen na silikagelu L 40/100 a výsledný prášek (extrakt + silikagel) byl nanesen na vrstvu silikagelu vytvořenou v chloroformu. Chromatografická kolona byla eluována chloroformem a směsí chloroform-ethanol v různých poměrech (97:3; 95:5; 93:7; 90:10; 85:15; 80:20; 70:30, 60:40, 50 : 50). Separace látek byla sledována pomocí TLC analýzy na deskách „Silufol UV 254“ a „Sorbfil PTSH-AF-A-UV“ v systémech chloroform – ethanol (4 : 1), dále chloroform – metanol – voda (26 : 14 : 3). Frakce obsahující látky 1 a 2 byly spojeny a z nich vytvořené sraženiny byly odděleny a poté rekrystalizovány z vodného alkoholu.

‘H NMR spektra izolovaných látek 1 a 2 byla získána na přístrojích Bruker AM 300 (300 MHz), hmotnostní spektra byla zaznamenána na hmotnostním spektrometru Kratos MS-30 a UV spektra byla zaznamenána pomocí spektrofotometru Specord 40 (Analytik Jena).

Sloučenina 1. Frangul-emodin 6-O-a-b-rhamnopyranosid (frangul A), oranžové krystaly o složení C21H20O9, t.t. 227-230 °C (vodný alkohol). UV spektrum (EUN, Xmax, nm): 225, 262, 285, 300 pl, 434. ‘H NMR spektrum (1 MHz, DMSO-^s, 300, ppm, 5/Hz): 1 (1,14H, d, I = 3, CH6 rhamnosy), 3 (2,40H, s, aromatický CH3 na C-3), 3-3,3 (4,2H rhamnosy), 4 (5,60H, rozšířený singlet, H-1 rhamnopyranóza), 11 (6,87H, d,

I = 2,5, H-2), 7,12 (1H, s, H-7), 7,23 (1H, s, I = 2,5, H-4), 7,47 (1H, s, H-5), 11,85 (1H, s, 5-OH skupiny), 12,00 (1H, s, 8-OH skupiny). Během kyselé hydrolýzy se fangulin A štěpí na rhamnózu a aglykon, kterým je frangula-emodin (1,6,8-trihydroxy-3-methylanthrachinon): M+ aglykon 270 (30 %), 256 (100 %).

Sloučenina 2. 6-O-P-O-apiofuranosid frangul-emodinu (frangulin B), oranžové krystaly kompozice C20H1809, M+ aglykon 270 (30 %), 256 (100 %), t.t. 184-187 °C (vodný alkohol). UV spektrum (EUN, Xmax, nm): 224, 263, 285, 300 pl, 434. NMR spektrum (300 MHz, DMSO-^s, 5, ppm, 1/Hz): 2,28 (3H, s, aromatický CH3 při C-3), 3,2-4,3 (4H apiofuranóza), 5,58 (1H, d, I = 4, H-11 apiofuranóza), 6,82 (1H, d, I = 2,5, H-2), 7,12 (1 H, s, H-7), 7,20 (1H, s, I = 2,5, H-4), 7,43 (1 H, s, H-5), 11,84 (1H, s, 5-OH skupiny), 11,98 (1H, s, 8 -OH skupiny). Po kyselé hydrolýze je frangulin B štěpen na apiózu a aglykon identifikovaný jako frangula-emodin (1,6,8-trihydroxy-3-methylanthrachinon): aglykon M+ 270 (30 %), 256 (100 %).

Frangulin A a Frangulin B byly poprvé izolovány v Ruské federaci z kůry krušiny, což odpovídá údajům zahraniční literatury a vytváří perspektivu kritické revize metod standardizace surovin a přípravků této rostliny. Studie TLC ukázala, že dominantním antraglykosidem v kůře řešetláku fragilis je frangulin A (obr. 1). Chromatogram vodně-alkoholového extraktu z kůry krušiny také odhalil fangulin B a frangula-emodin (obr. 1). Literární údaje [6] nám navíc umožňují identifikovat další dva antraglykosidy – glukofrangulin A a glukofrangulin B (obr. 1). Výsledky studií nám umožňují doporučit TLC ke stanovení pravosti řešetlákové kůry pomocí standardního vzorku frangulina A, který má podle našeho názoru zvláštní diagnostickou hodnotu pro suroviny této rostliny.

Rýže. 1. Schéma tenkovrstvého chromatogramu

složky řešetlákové kůry:

1 – hydroalkoholová těžba surovin;

2 – frangulin A; 3 – frangulín B;

4 – frangula-emodin; 5 – glukofrangulin A;

6 – glukofrangulin B

Podle našeho názoru je pro účely identifikace kůry krušiny také vhodné použít metodu UV spektroskopie, kterou jsme doporučili pro kvantitativní stanovení množství derivátů antracenu v surovinách této rostliny [11]. V tomto případě použitý zkušební roztok, na rozdíl od roztoku původního vodně-alkoholového extraktu z kůry řešetláku, má charakteristické absorpční maximum při vlnové délce 524 nm + 2 nm (obr. 2), které odpovídá vlnové délce roztoku fangulinu A (v přítomnosti alkalického roztoku amoniaku).

Výsledky studia komponentního složení antraglykosidů v kůře krušiny tedy umožnily zjistit, že dominantní látkou této suroviny je fangulin A (6-O-a-b-rhamnopyranosid frangul-emodinu), který lze použít pro účely standardizace pomocí TLC a spektrofotometrie.

Rýže. 2. Elektronická spektra roztoku vodně-alkoholového extraktu z kůry řešetláku (1), zkušebního roztoku (2) a roztoku frangulina A (v přítomnosti alkalického roztoku amoniaku) (3)

1. Poprvé v Ruské federaci byly z kůry řešetláku (Frangula alnus Mill.) izolovány frangulin A (b-O-a-b-rhamnopyranoside frangula-emodin) a fangulin B (b-O-P-B-apiofuranoside frangula-emodin).

2. Byla vyvinuta metoda pro stanovení pravosti surovin z řešetláku pomocí chromatografie na tenké vrstvě detekcí dominantního antraglykosidu frangulinu A v přítomnosti vhodného standardního vzorku.

3. Přítomnost v elektronickém spektru zkušebního roztoku křehké kůry řešetláku s absorpčním maximem při vlnové délce 524 nm + 2 nm (v přítomnosti alkalického roztoku amoniaku), odpovídající spektrálním charakteristikám fangulinu A být považován za diagnostický znak suroviny této rostliny.

1. Georgievsky V.P., Komisarenko N.F., Dmitruk S.E. Biologicky aktivní látky léčivých rostlin. Novosibirsk, 1990. 333 s.

2. Kurkin V.A. Farmakognozie: učebnice pro studenty farmaceutických univerzit (fakult). 2. vyd., revidováno. a doplňkové Samara, 2007. 1239 s.

3. Kurkin V.A. Základy bylinkářství: učebnice pro studenty farmaceutických univerzit. Samara, 2009. 963 s.

4. Muravyova D.A., Samylina I.A., Yakovlev G.P. Farmakognosie: učebnice. M., 2002. 656 s.

5. Státní lékopis SSSR. Jedenácté vydání. sv. 2. M., 1990. 400 s.

6. Wagner H., Bladt S. Plant Drug Analysis. Atlas tenkovrstvé chromatografie. Berlín – Heidelberg – New York, 1996. 384 s.

7. Rostlinné zdroje SSSR: Kvetoucí rostliny, jejich chemické složení, využití; Čeleď Ruta-ceae – Elaeagnaceae. L., 1988. str. 182-186.

8. Wagner H. Pharmazeutische Biologie. Drogen und ihre Inhaltsstoffe. Stuttgart-New York: Gustav Fischer Verlag, 1993. 522 s.

9. Muzychkina RA Přírodní antrachinony. Biologické vlastnosti a fyzikálně-chemické charakteristiky / Ed. od GA Tolstikova. Moskva, 1998. 864 s.

10. Evropský lékopis. 4th Ed. Rockville: United States Pharmacopoeial Convention, Inc., 2002. Pp. 1224-1225.

11. Kurkin V.A., Shmygareva A.A. Stanovení derivátů anthracenu v kůře krušiny // Farmacie. 2010. T. 58,